方案優(yōu)勢

10種鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)在l～800 mg／L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限在0.5～1 mg／L之同，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在O．36％～2．35％之間。相對于常規(guī)分析方法，分析時間和有機溶劑用量均減少2／3。該方法可在常規(guī)液相色譜儀上實現(xiàn)，具有較強的實用性和可操作性。

采用標(biāo)準(zhǔn)

相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

方法/原理/步驟

　　試劑

　　10種鄰苯二甲酸酯類化合物包括鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二正丙酯(DPP)、鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二正戊酯(DAP)、鄰苯二甲酸二正己酯(DHP)、鄰苯二甲酸丁基芐酯(BBP)、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯(DcHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DOP)和鄰苯二甲酸二異辛酯(DEHP)，德國Dr.Ehren—storfer公司；甲醇(色譜純)，美國Tedia公司；超純水，美國Milli—Q。

　　實驗方法

　　校準(zhǔn)曲線的制備

　　混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(p=1 000 mg／L)：分別稱取10種鄰苯二甲酸酯類化合物標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g(精確到O.1 mg)，用甲醇溶解，移人50 mL容量瓶中，定容，搖勻，配成質(zhì)量濃度為1 000 mg／L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

　　移取鄰苯二甲酸酯類化合物標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液0、1.OO、2.00、4.OO、6.00、8.00 mL于10 mL具塞刻度管中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。此時溶液中各組分濃度分別為O、100、200、400、600和800 mg／L。在設(shè)定色譜條件下，分別取5“L進行HPLC分析。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度和峰面積，繪制校準(zhǔn)曲線。

　　樣品處理

　　稱取樣品約1g(精確至1mg)于10 mL具塞刻度管中，加入甲醇至刻度，振搖，超聲提取20 min，必要時高速離心。經(jīng)0.45um濾膜過濾，濾液作為待測樣液備用。

　　測定

　　按前述色譜條件操作，以保留時間定性，外標(biāo)法定量。若樣品中待測組分含量過高，應(yīng)用甲醇稀釋后測定。色譜圖檢出的物質(zhì)，經(jīng)與該物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)紫外光譜圖比較確證后，根據(jù)峰面積，從校準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)組分的質(zhì)量濃度。

　　色譜條件的選擇

　　以常規(guī)液相色譜柱(TC-C18(2)，5um，4.6 mm×250 mm，安捷倫)為分析柱。以甲醇-水為流動相，按照國家食品藥品監(jiān)督管理局提供的《化妝品中鄰苯二甲酸酯類化合物的檢測方法》中的梯度洗脫條件，進樣分析，結(jié)果如圖1所示。整個分析過程需要30 min(25 min的色譜分離時間加5 min的色譜柱平衡時間)，與文獻報道基本一致。采用快速分析色譜柱，整個分析過程縮短為9 min(7 min的色譜分離時間加2 min的色譜柱平衡時間)(見圖2)，分析時間縮短了2／3，大大提高了工作效率，同時節(jié)省了有機溶劑。

　　方法的可操作性討論

　　常規(guī)液相色譜儀是基層實驗室普及率較高的一類分析儀器，常規(guī)的液相分析方法需要的分析時間比較長(一般在30 min左右)，有機溶劑消耗量也較大。采用亞2肛m顆粒填料的超高壓液相色譜方法具有色譜柱效高、分析速度快等優(yōu)點，同時也大大降低了溶劑消耗量。然而采用小粒徑填料的色譜柱反壓很高，需要提供足夠的柱前壓，超出常規(guī)液相色譜儀的承受范圍(一般不超過20 MPa)，從而影響了快速分析檢測的實現(xiàn)。

　　裝填具有核殼結(jié)構(gòu)的表面多孔顆粒填料的色譜柱，具有低反壓和高柱效的特點，可以在常規(guī)液相色譜儀上實現(xiàn)快速分析檢測。文獻報道采用超高效液相色譜法分析四種鄰苯二甲酸酯，分析時間為3 min，但需要專門的超高效液相色譜儀器。使用常規(guī)液相色譜柱(圖1)，在整個分析過程中柱前壓在12～24 MPa之間變化(流動相中有機溶劑含量的變化導(dǎo)致流動相黏度改變，進而導(dǎo)致柱前壓隨之變化)；而采用快速分析柱(圖2)的柱前壓在10～18 MPa之間變化(此條件下流動相中有機含量較高，在一定程度上降低了流動相的黏度)，常規(guī)液相色譜一般均可提供20 MPa的柱前壓，因此該方法具有較強的可操作性，易于在基層實驗室普及的常規(guī)液相色譜儀上實現(xiàn)快速分析檢測。

儀器設(shè)備

　　儀器

　　1200高效液相色譜儀(配備四元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱和二極管陣列檢測器)，安捷倫公司；常規(guī)液相色譜柱TC-C18(2)(5um，4.6 mm× 250mm).安捷倫公司；快速分析柱Poroshell 120EC-C18(2.7um，4.6 mm×75 mm)，安捷倫公司；超聲波清洗器；高速離心機。

　　色譜條件

　　柱溫：30℃；流速：1 mL／min；流動相A：水；流動相B：甲醇；梯度洗脫，洗脫程序為：常規(guī)分析方法，[0—12- 15—22—23—25]min，[75—75—100一100一75—75]%B(體積分?jǐn)?shù))；快速分析方法，[0—2—4—6—7—8]min，[82—82—100一100一82—82]%B(體積分?jǐn)?shù))；紫外檢測波長:80 nm；進樣體積：5uL。