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溶液中大分子穩定性測量

http://www.9999966666.com 檢測通 時間:2014-11-25

【摘要】

MicroCal VP-DSC是一種極其靈敏而易于使用的差示掃描量熱儀,適用于研究溶液中的樣品。 它能直接測量結構化大分子(如蛋白質和核酸)的分子內穩定性,以及復合體(如寡聚蛋白質、核酸雙鏈體和脂類以及洗滌劑膠束系統)的分子間穩定性。

方案優勢

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采用標準

測量類型:溫度中點Tm測量類型:焓?H測量類型:熱容變化?Cp樣品量:700μL樣品池容積:500μLSample capacity:2 -5 個樣品/ 8小時(手動系統)Cell material:鉭樣品池:硬幣形Noise:0.25μCal/°CTypical sample concentration:0.1 - 2.0mg/mL溫度范圍:-10°C ~ 130°CMaximum scan rate:90°C/h 或 120°C/hResponse time:7s(高反饋)Multiple feedback modes:是(被動、高增益、低增益)Automated upgrade available:否Baseline repeatability:1.25μCal/°C電源功率:11-240V, 50/60Hz, 70W重量:8.2kg尺寸 (寬, 長, 高)::200mm x 440mm x 190mm 運行環境 Temperature (operating):10°C 到 28°C濕度::0% ~70% 相對濕度,無冷凝

方法/原理/步驟

  MicroCal VP-DSC用于研究生物分子的分子內穩定性。它提供快速準確的躍遷點(Tm)測定并生成熱力學信息,以便讓我們能夠深入了解影響構象和穩定性的因素。

  溶液中的生物分子在其自然(折疊)構象和變性(去折疊)構象之間保持平衡。測得的熱躍遷中點(Tm)可提供快速、簡易的穩定性指示。Tm值越大,生物分子越穩定。

  測量原理

  由蛋白質和其他大分子形成的清晰結構經歷溫度誘導的構象變化,如去折疊。這些變化造成非共價鍵重新分配,從而導致熱吸收。差示掃描量熱儀測量這種熱量的吸收。

  Prod-VP-DSC_1

  MicroCal VP-Capillary DSC的熱核心包括參比池和樣品池,均封裝在一個絕緣夾套中。該裝置設計成始終保持兩池處于相同溫度。測量過程中,參比池和樣品池同時以恒定的掃描速率加熱。樣品分子去折疊時,吸收熱量,樣品池和參比池間形成溫差(ΔT)。這就導致整個帕帖爾單元內部形成熱梯度,對兩池進行冷卻和加熱,從而形成電壓。電壓被轉化為電功率,控制帕帖爾單元將ΔT(溫差)恢復為0。

  例如,由于蛋白質去折疊是一個吸熱事件,在信號中觀察是一個正位移(熱容)。該“溶解”躍遷的中點為Tm,曲線下的面積就是該過程的焓(ΔH)。

儀器設備

  差示掃描量熱法(DSC)是一種用來表征蛋白質和其他分子穩定性的強大分析工具。MicroCal VP-DSC提供快速、準確的躍遷點(Tm)確定功能,可生成樣品的熱力學信息,讓我們能夠深入了解影響構象和穩定性的因素。

  MicroCal VP-DSC支持無標簽研究自然狀態的分子,可用于彩色溶液或渾濁的懸浮液。它可測量極其嚴格的結合常數,最高可達1020M-1。上樣后無需操作節省了操作人員的時間,并且整個系統不需要其它配件、試劑或耗材。

  典型應用包括測定蛋白質穩定性和去折疊熱力學特性、抗體域結構測定、膜和脂質鑒定和超緊密分子相互作用的測量。

  非反應性鉭池提供出色的耐化學性。

  池固定在原位,給出可再生和超靈敏的性能,并只需低程度維護。

  有三個用戶可選的響應時間,實現最佳性能。

  用戶可選的溫度掃描速率和范圍,應用多樣性。

  自持式增壓系統(0.46 psi),適于研究溫度高于沸點的溶液。

  可提供用于測定微分比容的壓力擾動量熱附件。

  帕帖爾元件保證精確的溫度。

  包括MicroCal Thermovac™樣品制備和清洗裝置。

  通過VPViewer™軟件控制,通過Origin®進行數據分析。

  Tm飄移配體結合篩選。

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