利用模擬酶催化顯色和等溫核酸擴增反應檢測特定序列DN
http://www.9999966666.com 來源：分析化學期刊 時間：2014-03-07
基于血紅素(Hemin)與G鄄四聯體(G4)所形成模擬酶的催化作用,結合等溫指數擴增反應(IEX鄄PAR),建立了特定序列DNA的顯色檢測方法。目標DNA引發IEXPAR,通過設計模板序列,IEXPAR產生大量富含鳥嘌呤的單鏈DNA,在K+存在時,該單鏈DNA可形成G4結構,G4可以與Hemin結合形成具有過氧化物酶活性的模擬酶(Hemin鄄G4),Hemin鄄G4催化H2 O2氧化2,2鄄聯氮鄄二(3鄄乙基鄄苯并噻唑鄄6鄄磺酸)二銨鹽(ABTS),使體系顏色發生變化,反應產物最大吸收波長為421 nm。對顯色反應體系中的實驗參數進行了優化,包括Hemin濃度、ABTS濃度、H2 O2濃度、IEXPAR時間和顯色反應時間。在最佳條件下,所建立的體系可以簡便、快速檢測0. 1 ~10 nmol/ L的目標DNA分子,且本方法能夠很好地區分單個堿基的差別,具有良好的特異性。
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