檢測認證人脈交流通訊錄
- 羊抗人Tf血清
操作步驟
試管法（改良 Mayer 法）
1、致敏羊紅細胞： 2%綿羊紅細胞加等量稀釋后的溶血素（ 1:2000），混勻，置 37℃水浴 30min。
2、稀釋血清：待測血清 0.2ml，加應用液 3.8ml，稀釋度為 1:20。
3、配制溶血標準管：全溶血管:2%綿羊紅細胞 2ml 加 8ml 蒸餾水，混勻。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。
4、按表所示，依次加各成分于試管中，混勻，置 37℃水浴 30min， 第 10 管為非溶血對照：補體 CH50 測定試管法
5、結果測定：取出試管， 2000r/min 離心 10min，對照管應不溶血。肉眼比色，選與 50%溶血標準管相近二管，再用分光光度計測（波長 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，
確定與標準管最接近者為終點管，然后按下公式計算 CH50 值：
血清補體 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀釋度。
如第 5 管為終點管，測待測血清中CH50為66.7U/ml。血清補體CH50正常值為50-100U/ml。
羊抗人Tf血清
標本的采集及保存
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則：
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。最后計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則：
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
羊抗人Tf血清
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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