檢測認證人脈交流通訊錄
- 凍干羊抗人C3D血清
標本要求
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保
存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心20
分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀
形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。
5.培養細胞:
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100 萬/ml 左右。
通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左
右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6.組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化
后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻
漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢
測,其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進
行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
8.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
凍干羊抗人C3D血清
應用范圍:
酶標試劑、免疫比濁試劑、免疫膠乳試劑生產、提取純化抗體、組化實驗中
對應抗原,或封閉對應雜抗體,測定對應抗原濃度,或抗原夾芯法測定對應
抗體,吸收雜抗原成分,層析純化抗原,分析與鑒定對應抗原成分,封閉交
叉抗原,測定對應抗原成分,測定抗原純度等。
1.液體抗血清保存原則:避免反復凍融
2.短期保存的抗血清:如幾周內就會使用,收到后推薦在 2-8℃保存,2-8℃短暫保存
數周對活性沒有影響。
3.長期保存的抗體:如抗體需超過 1 個月后才會使用,請酌情分裝后于-20℃保存。
凍干羊抗人C3D血清
操作步驟
試管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊紅細胞: 2%綿羊紅細胞加等量稀釋后的溶血素( 1:2000),混勻,置 37℃水浴 30min。
2、稀釋血清:待測血清 0.2ml,加應用液 3.8ml,稀釋度為 1:20。
3、配制溶血標準管:全溶血管:2%綿羊紅細胞 2ml 加 8ml 蒸餾水,混勻。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置 37℃水浴 30min, 第 10 管為非溶血對照:補體 CH50 測定試管法
5、結果測定:取出試管, 2000r/min 離心 10min,對照管應不溶血。肉眼比色,選與 50%溶血標準管相近二管,再用分光光度計測(波長 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,
確定與標準管最接近者為終點管,然后按下公式計算 CH50 值:
血清補體 CH50( U/ml) =( 1/血清用量)×稀釋度。
如第 5 管為終點管,測待測血清中CH50為66.7U/ml。血清補體CH50正常值為50-100U/ml。
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