供mabtech的ELISpot試劑盒 欣博盛供

Elispot的優質供應商——Mabtech

酶聯免疫斑點檢測（enzyme-linked immunospot assay, elispot）結合了Elisa技術和細胞培養技術，在單細胞水平監測細胞因子的分泌情況。其原理是用elispot板上捕獲抗體特異性結合細胞所分泌的因子，然后用斑點的形式呈現出來的一種方法。mabtech的Elispot在全球的質量和性價比屈指可數。

1.酶聯免疫斑點檢測方法有如下優點：

1.1 靈敏度高，可以達到1/1000000,是非常靈敏的檢測手段。比傳統elisa要高2到3個數量級。

1.2 適合用于高通量篩選。分離的細胞不需要進行體外擴增，實驗人員能夠在同一次實驗進行多塊板的操作。

1.3 單細胞水平的檢測，elispot的技術能夠檢測到單個細胞分泌細胞因子的情況。

2. 實驗步驟：

2.1 Mabtech的Elispot是在底物有pvdf膜的96孔板上實驗。

分為兩種板，一種需要客戶自己包板的basic系列，另一種是已經包被好捕獲抗體的pro和plus系列。

2. 2 在mabtech的elispot的板上加入細胞和各種刺激物共培養。在抗原特異性或者非特異性有絲分裂的影響下，數小時內，細胞就可以分泌各種細胞因子。

2.3 分泌的細胞因子能夠被板上的包被抗體捕獲，洗去板上的細胞。

2.4 加入生物素化的檢測抗體能夠和特異性的分泌因子結合。

2.5 Mabtech能夠提供兩種顯色系統，HRP和ALP。針對hrp顯色體系，加入辣根過氧化物標記的鏈霉親和素。針對ALP顯色體系，加入堿性磷酸酶標記的鏈霉親和素。

兩者的區別在于，ALP顯色時間較長，但是斑點持久，實驗完成后，斑點可以一直保存在膜上，隨時可以觀察。HRP系統顯色時間較短，但是斑點在膜上很快會褪色，不利于長期保存。Mabtech建議客戶可以選擇ALP顯色系統。

2.6 每一個斑點都對應一個分泌該因子的細胞，通過Elispot讀板儀計算每孔中的斑點數。Mabtech很新推出的的IRIS，與其他品牌的酶聯斑點儀器相比，

IRIS具有如下優點：

2.6.1 操作簡便，客戶經過1-2個小時培訓，能夠熟練操作系統。

2.6.2 通過構建數學模型對每個點進行計算，使計數更加客觀。

2.6.4 IRIS還能夠用于熒光酶聯斑點實驗（fluorospot）結果的檢測，且目前最多能夠進行4種熒光的分析。基于對每個點3d立體分析，能夠準確定位每個斑點的中心，有效計入每個實際的斑點，去掉非特異性斑點。

3. Elispot的應用和熱銷產品

3.1. 疫苗研發 很多疫苗研發的客戶會選擇酶聯免疫斑點實驗（Elispot）進行細胞情況的分析，比較熱銷的產品時人的IFN gamma，il-2和igG等指標。

3.2. 細胞treatment領域 通過Elispot試劑盒能夠靈敏地監測免疫反應。主要的熱銷指標有：human IFN-gamma, Granzyme B，或者是TNF-alpha，IL-12/23等指標。

4. 當然如果有Flurospot可以一起檢測以上幾個指標，實驗變得更加的簡單和快速。Fluorospot還有其他的應用。

4.1 抗體亞型鑒定 Mabtech新推出的小鼠抗體亞型鑒定試劑盒，基于Elispot，快速鑒定IgG亞型。

如果您需要咨詢更多Mabtech的ELISpot信息，請聯系欣博盛生物。