DNA的分離•回收
限制性酶片段的回收
PCR產(chǎn)物的回收

Prepforesis S制備電泳系統(tǒng)的特長(zhǎng)
·回收部分的構(gòu)造最大限度的防止污染(特長(zhǎng)一)
·特有的回收方式「斷續(xù)-空氣置換送液方式」(特長(zhǎng)二)
·利用聚丙酰胺的高分離效果(優(yōu)于層析的分離效果)
·自動(dòng)控制,操作簡(jiǎn)單
·電泳槽,電源,泵,冷卻用熱交換器,控制部分一體化設(shè)計(jì)

特長(zhǎng)的詳細(xì)介紹
回收部的構(gòu)造
傳統(tǒng)的制備電泳裝置,回收部使用透析膜區(qū)分下部電泳緩沖液和目標(biāo)成分,但目標(biāo)成分會(huì)在電場(chǎng)作用下吸附在透析膜上,引起污染.而AE-6750S的回收部設(shè)計(jì)成兩個(gè)圓柱凝膠上下相挾的空間形式.通電后,電泳泳動(dòng)分離出的目的成分溶于回收部中填充的回收液中.但目的成分不會(huì)吸附在回收部下部的凝膠上.

「斷續(xù)-空氣置換送液方式」
傳統(tǒng)的制備電泳分離裝置中,在電場(chǎng)的作用下,目的成分會(huì)吸附在回收部下部的透析膜上,所以必須使回收液連續(xù)快速流動(dòng)來(lái)回收目的成分.所以目的成分會(huì)被回收液稀釋.

AE-6750采用的是回收液非循環(huán)方式.回收時(shí),電泳也一同停止,回收液經(jīng)泵送至收集器回收,同時(shí),向回收部注入一段時(shí)間空氣,使回收部保持空的狀態(tài).回收完成后,再由泵注入新的回收液,所以這一劃時(shí)代的先進(jìn)方法被稱(chēng)為「斷續(xù)-空氣置換送液方式」.因?yàn)闊o(wú)需使用太多回收液,所以最大限度的防止目的成分被稀釋.

制備電泳Prepforesis S 的操作流程如下:
根據(jù)預(yù)備電泳(垂直板電泳)的條帶判定是否能分離
① 預(yù)備電泳: ↓
判定可以分離時(shí),摸索確定分離條件
樣品濃度(分離的最適濃度和最后確認(rèn)實(shí)驗(yàn)時(shí)的必須濃度)
凝膠濃度(參考預(yù)備電泳,摸索分離時(shí)的最適濃度)
電泳條件
↓
② Prepforesis S 進(jìn)行樣品分離前,必須進(jìn)行以下工作
泳動(dòng)準(zhǔn)備 樣品,圓柱凝膠,緩沖液,回收液的配置
安裝電泳槽及電泳緩沖液的預(yù)備恒溫
分離條件的設(shè)定
向配管及回收部中添加回收液
添加樣品
↓
③ 開(kāi)始自動(dòng)分離: 添加樣品后,按照設(shè)定的條件進(jìn)行自動(dòng)分離,回收
↓
④ 分離成分確認(rèn): 經(jīng)制備電泳Prepforesis S系統(tǒng)回收的分離成分,用Mini垂直板電泳或用活性測(cè)定來(lái)確認(rèn)
↓
目的成分可以確認(rèn)時(shí),該分離成分可以用于活性測(cè)定,質(zhì)量分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)

主要技術(shù)指標(biāo)：
圓柱膠的體積： 內(nèi)徑 16 mm/ 長(zhǎng) 8mm
支架/膠濃度：PAGE膠 6% - 20%
樣品量：2.0 mg (質(zhì)量) / 2.0 ml (體積)
回收部體積：0.8 ml
緩沖液量：1000 ml
循環(huán)泵流量：650 ml/分鐘 (泵工作時(shí)間 1–999分鐘)
分離時(shí)間：1–999 分鐘 (1 分鐘 / 檔)
收集器輸出信號(hào)：MAKE接點(diǎn)/open collector 400 ms (step式信號(hào)) 15mA
電源輸出：恒定電流 5 mA , 10mA , 15mA , 20 mA , 25mA , 30mA , 40mA可變換輸出(梯度、程序)；異常輸出自檢功能
條件設(shè)定：輸出電流值 / 延遲時(shí)間 / 分離循環(huán)中的泳動(dòng)通電時(shí)間 / 溶液回收時(shí)間/回收溶液充填時(shí)間 / 分離階段數(shù)
使用溫度范圍：5 - 65℃
控制內(nèi)容顯示：熒光LED顯示板 40 行 × 20 字
尺寸 質(zhì)量：260 (w) × 380 (l) × 420 (h) mm 11Kg

大鼠肌肉抽提物經(jīng)制備電泳Prepforesis S系統(tǒng),用SDS-PAGE分離回收
(制備電泳Prepforesis S的電泳條件)
樣品：大鼠肌肉抽提物
濃縮膠組成：4.5%PAGE Tris-HCL-SDS 緩沖液( pH 6.8 )
分離膠組成：12.5%PAGE Tris-HCL-SDS 緩沖液( pH8.8 )
分離膠長(zhǎng)：20 mm
電泳用緩沖液：Tris-Gly-SDS 緩沖液
回收用緩沖液：Tris-HCL 緩沖液( pH8.8 ),20%蔗糖
回收液量：0.8 ml / 組分
分畫(huà)時(shí)間：5 分鐘
通電：15 mA恒定電流
泳動(dòng)時(shí)間：10 小時(shí)
緩沖液溫度：20℃