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百泰 TMT/iTRAQ/MultiNotch定量蛋白組學分析

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    • iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和(Tandem Mass Tags)技術(shù)是分別由美國AB Sciex公司和Thermo Fisher公司研發(fā)的多肽體外標記定量技術(shù)。這兩種技術(shù)采用多個(2-10)穩(wěn)定同位素標簽,特異性標記多肽的氨基基團進行串聯(lián)質(zhì)譜分析,能夠同時比較多達10種不同樣本中蛋白質(zhì)的相對含量,可用于研究不同病理條件下或者不同發(fā)育階段的組織樣品中蛋白質(zhì)表達水平的差異。 對于可以傳代的細胞樣品來說,我們可以采取的方法完成對于細胞蛋白質(zhì)組的標記過程,但是許多其他研究體系,比如組織樣品以及不能進行傳代培養(yǎng)的細胞來說,需要其他的標記方法來完成定量蛋白組學分析。TMT, iTRAQ等基于體外(in vitro)標記的定量方法應(yīng)運而生。 iTRAQ標簽包括三部分,如下圖: 1. 報告基團(reporter group):指示蛋白樣品豐度水平。 2. 平衡基團(balance group):平衡報告基團的質(zhì)量差,使等重標簽重量一致,保證標記的同一肽段m/z相同。 3. 肽反應(yīng)基團(amine-specific reactive group):能與肽段N端及賴氨酸側(cè)鏈氨基發(fā)生共價連接,從而標記上肽段。
      來自不同樣品的同一肽段經(jīng)TMT/iTRAQ試劑標記后具有相同的質(zhì)量數(shù),并在一級質(zhì)譜檢測(MS1)中表現(xiàn)為同一個質(zhì)譜峰。當此質(zhì)譜峰被選定進行碎裂后,在二級質(zhì)譜檢測(MS2)中,不同的報告基團被釋放,它們各自的質(zhì)譜峰的信號強弱,代表著來源于不同樣品的該肽段及其所對應(yīng)的蛋白的表達量的高低。TMT/iTRAQ定量蛋白組學研究因其測定jīngzhǔn度高適應(yīng)樣品種類多,目前已有很廣泛的應(yīng)用。百泰派克在傳統(tǒng)的TMT/iTRAQ分析技術(shù)的基礎(chǔ)上,提供TMT/iTRAQ/MultiNotch MS分析技術(shù),使用三級碎片報告離子進行定量,可進一步提高TMT/iTRAQ定量蛋白組學分析的精度,進一步提高定量準確性。 百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺,Orbitrap Fusio Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,推出基于TMT/iTRAQ/MultiNotch MS的定量蛋白組分析服務(wù)技術(shù)包裹,您只需要將您的實驗?zāi)康母嬖V我們并將您的蛋白寄給我們,我們會負責項目后續(xù)所有事宜,包括蛋白酶切、肽段標價、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學分析。
      iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析技術(shù)特點
      高通量定量蛋白分析:可以同時分析10個樣品;適合大量臨床樣本,多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物  體外標記,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品  質(zhì)譜分析靈敏度高,可檢測較低豐度蛋白,大范圍比較蛋白相對豐度  可與富集磷酸化等修飾肽段的方法聯(lián)用,更準確研究翻譯后修飾變化
      中/英文項目報告
      在技術(shù)報告中,百泰派克生物科技會為您提供詳細的中英文雙語版技術(shù)報告,報告包括: 1. 實驗步驟(中英文) 2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)(中英文) 3. 質(zhì)譜圖片 4. 原始數(shù)據(jù) 5. 蛋白差異水平分析 6. 生物信息學分析
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