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納米抗體beads

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1.產(chǎn)品介紹 Flag標(biāo)簽是一個(gè)由八個(gè)親水氨基酸組成的多肽片段，定位在融合蛋白表面，因此更易與抗體結(jié)合以及被腸激酶分解。DYKDDDDK-Nanoab-agaroseBeads是以抗Flag(DYKDDDDK)納米抗體為親和配體，一步純化原核、酵母或哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的Flag標(biāo)簽融合蛋白。 DYKDDDDK-Nanoab-agaroseBeads以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì)，雜蛋白非特異性結(jié)合少，可用于Flag標(biāo)簽融合蛋白的純化和免疫沉淀（IP)。 2.試劑準(zhǔn)備 2.1樣品準(zhǔn)備上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強(qiáng)度和pH值，可以用平衡液對(duì)樣品或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋，或者用平衡液透析。樣品在上樣前建議離心或用0.22um或0.45um濾膜過濾，減少雜質(zhì)，提高蛋白純化效率和防止堵塞柱子。 2.2緩沖液的準(zhǔn)備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22um或0.45um濾膜過濾。平衡/洗雜液：50mMTris，0.15MNaCl，pH7.4 酸性洗脫液：0.1MglycineHCl，pH3.0 競(jìng)爭(zhēng)性洗脫液：50mMTris，0.15MNaCl，100-500ugflag多肽/ml，pH7.4 中和液：1MTris-HCl，pH8.0 3.樣品純化 3.1柱層析 1)將DYKDDDDK-Nanoab-agaroseBeads裝入合適的層析柱，層析用5倍柱體積的平衡液進(jìn)行平衡，使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下。 2)將樣品加到平衡好的DYKDDDDK-Nanoab-agaroseBeads中，收集流出液，可以反復(fù)上樣增加結(jié)合效率。 3)用10倍柱體積的洗雜液進(jìn)行清洗，去除非特異性吸附的雜蛋白，收集洗雜液。 4)A酸性洗脫∶使用5倍柱體積的酸性洗脫液洗脫，收集管中預(yù)先加好中和液，加入量15-25ul中和液/ml洗脫液，分管收集。注：酸性洗脫后填料要立即用平衡液平衡，DYKDDDDK-Nanoab-agaroseBeads在洗脫液中不要超過20min。 B競(jìng)爭(zhēng)性洗脫：使用5倍柱體積的競(jìng)爭(zhēng)性洗脫液洗脫。分管收集。 5)使用3倍柱體積的洗脫液再生，然后用平衡液平衡至中性。 6)然后保存在含20%乙醇的PBS溶液中，2-8℃保存。 16、納米抗體beads http://www.lablead.com.cn/Products-38890990.html https://www.chem17.com/st534943/product_38890990.html

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