檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
- 人巨噬細(xì)胞趨化因子
人巨噬細(xì)胞趨化因子的應(yīng)用:雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中細(xì)胞趨化因子(MCF)水平。用純化的人細(xì)胞趨化因子(MCF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人巨胞趨化因子(MCF)含量。計(jì)算方式:用標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),OD為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品通過標(biāo)準(zhǔn)曲線被發(fā)現(xiàn)對(duì)應(yīng)濃度;乘以稀釋系數(shù);或標(biāo)準(zhǔn)濃度進(jìn)行計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程,樣品OD入方程,計(jì)算出的樣品濃度,再乘以稀釋因子,即實(shí)際樣品濃度。
人巨噬細(xì)胞趨化因子:是一類由細(xì)胞分泌的小細(xì)胞因子或信號(hào)蛋白。由于它們具有誘導(dǎo)附近反應(yīng)細(xì)胞定向趨化的能力,因而命名為趨化細(xì)胞因子。趨化因子的主要作用是誘導(dǎo)細(xì)胞定向遷移,被趨化因子吸引的細(xì)胞沿著趨化因子濃度增加的信號(hào)向趨化因子源處的遷徙。有些趨化因子在免疫監(jiān)視過程中控制免疫細(xì)胞趨化,如誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞到淋巴結(jié),這些淋巴結(jié)中的趨化因子通過與這些組織中的抗原提呈細(xì)胞相互作用而監(jiān)視病原體的入侵。這些被稱為穩(wěn)態(tài)趨化因子,在不需要刺激源細(xì)胞的情況下產(chǎn)生和分泌。有些趨化因子在發(fā)育中起作用;他們能刺激新血管形成(血管新生);引導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入組織,為細(xì)胞的成熟提供特定的信號(hào)。其他趨化因子在炎癥反應(yīng)中其關(guān)鍵作用,可以因應(yīng)對(duì)細(xì)菌感染、病毒感染由多種細(xì)胞釋放;也可以因非感染性的刺激如二氧化硅吸入,尿路結(jié)石等而釋放。趨化因子的釋放通常由炎癥細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素1(IL-1)刺激引起。炎性趨化因子的主要作用是作為白細(xì)胞的趨化劑,從血液中吸引單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和其他效應(yīng)細(xì)胞到感染或組織損傷的部位。某些炎性趨化因子可激活細(xì)胞來啟動(dòng)免疫反應(yīng)或促進(jìn)傷口愈合。它們由許多不同的細(xì)胞類型釋放,并對(duì)天然免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞起引導(dǎo)作用。
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