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將指數(shù)生長期的細胞暴露在細胞毒性藥物中，暴露的持續(xù)時間通常決定于產(chǎn)生最大損傷所需的時間，但是它也受藥物穩(wěn)定性的影響。將藥物撤除后，讓細胞再增殖 2~3 個群體倍增時間（PDT )，這樣就可以把能夠增殖的存活細胞與那些不能增殖的存活細胞區(qū)別開來。然后用 MTT 染料還原反應測定存活細胞的數(shù)目。只要 MTT—甲臜產(chǎn)物溶于適當溶劑中，就可以用分光光度法來定量。
 

先將不同濃度的藥物加入到微滴定板上培養(yǎng)的單層細胞中溫育（圖 22.5), 撤去藥物，每日換液至 2~3 個 PDT , 然后再次更換培養(yǎng)液并在每個孔中加入 MTT。于暗處溫育 4 h ，然后撤除培養(yǎng)基和 MTT 。將不溶于水的 MTT—甲臜結晶溶于 DMSO 中，加人緩沖液調節(jié)最終的 pH , 在 ELISA 讀板儀上記錄吸光值.